猪活体采卵（OPU）——超声引导取卵流程与注意事项
猪活体采卵（OPU，Ovum Pick-Up）是利用超声引导在活体母猪体内采集卵母细胞的非手术技术。本文科普介绍超声引导 OPU 的作用、设备要求、标准操作流程（SOP）、术前术后管理与动物福利要点，适合养殖场与育种中心参考。
一、什么是超声引导猪活体采卵（OPU）？为何应用？
超声引导 OPU 是通过猪用活体采卵B超检测卵泡，并在超声可视下用穿刺针吸取卵泡液以获得卵母细胞（oocyte）的技术。相比传统屠体取卵，OPU 无需宰杀，可对优良母猪重复采集，用于体外成熟（IVM）、体外受精（IVF）、胚胎培养与基因工程等应用，具有保存优良种质与快速扩繁的价值。多项近期研究与综述表明，虽在猪身上有解剖挑战，但经阴道/经会阴的超声引导 OPU 已被证实可实现并逐步优化。
二、适用设备与耗材（建议配置）
超声机：便携式或台式 B 型超声，需有实时显示、高帧率、线阵或小凸阵探头（5–7.5 MHz），并建议配合穿刺导向附件或针套导轨。
穿刺系统：专用穿刺针（常见18–20G），针套、负压吸引装置或冲洗回收管路。
采集与筛选器材：收集管、过滤网、显微镜、培养皿与保温台。
麻醉/镇静与隔离设备：用于术前镇静、必要时局部/硬膜外麻醉及术后复苏。
三、标准操作流程（SOP）——一步一步做法（科普/技术结合）
1）术前准备
动物筛选：选择健康、无活动感染的母猪或母猪群体；如需促排卵，按方案注射 PMSG/FSH 等，监测卵泡生长。禁食与环境：术前适当禁食，术区消毒、工具消毒，准备保温箱与复苏药物。
固定与镇静：物理固定（支架/夹具）或轻度镇静/麻醉（具体方案由兽医确定），以减少应激和运动造成的损伤。近期研究强调改良约束与镇静以降低应激并提高回收稳定性。
2）B 超定位
探头放置：常用经直肠（或经会阴/经阴道）方式将探头定位于卵巢附近；确保探头与卵泡在同一视场内并能清晰显示无回声卵泡腔。
图像评估：记录卵泡数量、大小（mm）、形态，选择合适直径（通常为中等至大窦卵泡）进行穿刺。
3）穿刺与吸取
对准导向：在超声影像引导下，将穿刺针通过导轨或导向套接近目标卵泡的最短路径（避开血管与肠管）。
穿刺动作：针尖进入卵泡腔后，启动负压或冲洗回收，缓慢抽取卵泡液。
多点重复：按序对可见卵泡逐个穿刺，注意针位调整与吸引力度，避免机械性损伤。相关动物与临床指南对穿刺压力、冲洗速度与针径有方法学建议（可参考牛/马 OPU 方法论并调整至猪的解剖特性）。
4）卵母细胞收集与初筛
液体过滤：将采集液通过滤网/离心步骤分离出颗粒，转移到培养皿。
显微挑选：在显微镜下挑出卵母细胞，评估成熟度（GV、MI、MII 等），放入 IVM 培养基。
记录与标识：记录每头母猪的回收个数与质量，便于后续统计与流程优化。
5）术后处理与动物监测
止血与消毒：对穿刺部位（如有外部穿刺）进行必要处置；若为经阴道/经直肠穿刺，注意降低感染风险。
恢复期观察：监测呼吸、体温、进食与排便情况；必要时给予抗生素或消炎镇痛药。
记录效益：统计每次 OPU 的卵母细胞回收数、成熟率与后续胚胎发育情况以优化方案。
四、常见问题与风险控制
卵子回收率波动：与母猪个体差异、刺激方案、操作者经验等相关。近期研究建议改良约束和麻醉以减少个体间差异。
组织损伤/出血风险：正确选择穿刺路径与避开血管是关键，超声实时监控可大幅降低风险。
卵母细胞质量问题：采集后尽快进入体外成熟培养，并严格控制温度与培养条件。
五、优势与商业价值
超声引导 OPU 可实现对优良种猪的重复、非致命性取卵，便于与体外受精/胚胎冷冻结合，支持基因库建立与快速扩繁。对于种猪场与育种中心而言，引入成熟的超声引导 OPU 流程与设备，能：
提高种公/种母的基因利用率；
降低活体运输与传染风险（通过胚胎流通替代活体运输）；
支持现代育种、基因编辑与科研应用。相关综述与实证研究对该方向的潜力有明确论述。
任何 OPU 项目在商业化推广前都应遵守当地动物保护法与兽医操作规范。研究表明，优化约束/镇静与术后管理能明显降低应激并提升回收稳定性。因此在方案设计中应把动物福利与生物安全放在首位。
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